1、移植的時間
劉偉國等通過腦外傷后不同時間移植神經(jīng)干細(xì)胞的療效對比研究，認(rèn)為腦缺血損傷后24小時移植的神經(jīng)干細(xì)胞在大鼠體內(nèi)存活率最高，原因是缺血損傷導(dǎo)致各種興奮性氨基酸、鈣離子、氧自由基等的大量生成以及炎癥細(xì)胞的局部浸潤，這些都是移植細(xì)胞存活的不利因素，而傷后24小時內(nèi)各種不利因素都處于高峰期，一直到24小時以后才逐漸恢復(fù)。在48小時進(jìn)行神經(jīng)干細(xì)胞移植，效果也不是非常理想，其原因可能是腦外傷12小時以后，各種神經(jīng)營養(yǎng)因子分泌也逐漸下降，而神經(jīng)營養(yǎng)因子對于神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化和遷移都起到重要的作用。另外，受傷時間越長，損傷灶內(nèi)膠質(zhì)瘢痕結(jié)構(gòu)就越緊密，這不利于神經(jīng)干細(xì)胞生長，同時也使其更難參與修復(fù)過程。因此，在受傷后24小時進(jìn)行神經(jīng)干細(xì)胞移植是比較適合的時機(jī)。阻斷右側(cè)大腦中動脈后，在腦室和腦梗死灶觀察到不同時間點(diǎn)移植的Brdu陽性的神經(jīng)干細(xì)胞向缺血周邊區(qū)明顯遷移，特別是缺血24小時后移植的細(xì)胞存活率、增殖程度和定向遷移都更加明顯，而這一時間窗剛好與這些細(xì)胞因子分泌高峰相吻合，因此考慮腦缺血后分泌的營養(yǎng)因子和趨化因子在缺血24小時較多，可能對隨后移植細(xì)胞的存活、增殖和遷移有重要的作用。
2、移植的免疫因素
傳統(tǒng)觀念認(rèn)為，神經(jīng)干細(xì)胞是一種處于相對原始的細(xì)胞，具有低免疫源性的特性，理論上不表達(dá)成熟細(xì)胞抗原，其抗原性較弱，因此外源性的神經(jīng)干細(xì)胞在移植后可能僅導(dǎo)致輕微的排斥反應(yīng)，甚至無排斥反應(yīng)。有實(shí)驗(yàn)證實(shí)新分離的和傳代的神經(jīng)干細(xì)胞的細(xì)胞膜表面均有MHCΙ類和Π類分子的表達(dá)，神經(jīng)干細(xì)胞能在體外誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)，說明其仍存在一定的免疫源性。因此，在缺血性腦損傷神經(jīng)干細(xì)胞移植治療中，有必要使用免疫抑制劑。目前，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為免疫抑制劑可減少排斥反應(yīng)，增加移植物的存活概率和存活時間。但是免疫抑制劑也可能是有害的，因?yàn)樗芤种泼庖呒?xì)胞進(jìn)入缺血區(qū)，而免疫細(xì)胞進(jìn)入缺血區(qū)不僅可以清除細(xì)胞碎片，還有利于傳遞神經(jīng)營養(yǎng)因子。所以，對免疫抑制劑的使用還需進(jìn)一步討論。
3、神經(jīng)干細(xì)胞移植治療腦卒中的臨床應(yīng)用
目前，神經(jīng)干細(xì)胞移植在治療動物缺血性腦損傷的方面取得了令人振奮的結(jié)果，但將其應(yīng)用到人體仍存在諸多問題。與其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病的細(xì)胞移植治療相比，缺血性腦損傷的細(xì)胞治療需要植入多種不同的細(xì)胞。例如大腦中動脈栓塞所造成皮質(zhì)、基底節(jié)、海馬等部位的梗死，導(dǎo)致神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的壞死與凋亡。因此，選擇哪一種或幾種細(xì)胞移植對于治療的成功至關(guān)重要。目前還需進(jìn)行大量的臨床前期工作，以便為臨床試驗(yàn)提供理論基礎(chǔ)。目前，臨床神經(jīng)干細(xì)胞移植研究比較少，楊清成等采用取自流產(chǎn)胎兒的腦組織的神經(jīng)干細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)后行腰椎穿刺將細(xì)胞移植入59例腦卒中患者的蛛網(wǎng)膜下腔，隨訪觀察24個月，結(jié)果59例患者的歐洲卒中量表評分和生活功能評分均較移植前有明顯提高。張儒有等采用蛛網(wǎng)膜下腔移植的方法將流產(chǎn)胎兒的腦組織的神經(jīng)干細(xì)胞移植給50例腦卒中患者，采用美國功能獨(dú)立性測評評分對患者術(shù)前及術(shù)6個月進(jìn)行評定，結(jié)果所有患者移植后的評分高于移植前。上述研究都表明神經(jīng)干細(xì)胞的移植治療缺血性腦損傷取得了一定的臨床療效。
